馮瑜菲 東北農(nóng)業(yè)大學(xué)
IgY 在多種環(huán)境下均具有良好的穩(wěn)定性,如耐熱、耐酸、耐堿和一定的抗酶降解能力。IgY 制劑在 4℃貯存 5 年或在室溫下貯存 6 個(gè)月,其抗體活性仍無明顯變化。在通常情況下,IgY 基本能夠耐受巴氏消毒,37℃下其活性基本無明顯變化。當(dāng)溫度達(dá)到 65℃時(shí),IgY 的活性可保持 24 h 以上,70℃加熱 90min 后活性下降,90℃處理 15min,大部分 IgY 活性喪失。
若是在 IgY 溶液中添加糖類物質(zhì)(如蔗糖、乳糖或海藻糖)可以提高其熱穩(wěn)定性,使 IgY 在75~80℃依然能夠保持較高的活性。lgY 在 pH4.0~11.0的范圍內(nèi)具有較好的穩(wěn)定性。當(dāng) pH 值低于 3.5 或高于 12 時(shí),IgY 的活性迅速降低。IgY 對(duì)反復(fù)凍融具有耐受性,實(shí)驗(yàn)表明經(jīng) 5 次反復(fù)凍融,其抗原結(jié)合活性幾乎不受影響。此外,IgY 能夠抵抗幼齡動(dòng)物的胃酸屏障及腸道中胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶的消化。IgY 在 37℃、pH2.8、低濃度胃蛋白酶存在下,處理 1.5 小時(shí)后用 ELISA 法檢測,其活性僅損失 1/4。Hatta 等也做了相關(guān)試驗(yàn),考察了 3 種主要的胃腸道蛋白酶對(duì)抗輪狀病毒特異性 IgY 穩(wěn)定性的影響,結(jié)果表明將胃蛋白酶和 IgY 在 pH2.0 溫育 lh 后,IgY 活性幾乎完全喪失,而在 pH4.0 溫育 lh 后,IgY 保持 91%的活性,甚至溫育 10h 后仍可維持 63%的活性。隨著 pH 值的降低,IgY 對(duì)胃蛋白酶的敏感性增強(qiáng)。IgY 對(duì)胰蛋白酶及胰凝乳蛋白酶的水解穩(wěn)定性較好。將 IgY 分別與胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶溫育 8h 后,其活性分別保持在 39%和 41%。
IgY 具有獨(dú)特的生物學(xué)特性。由于禽類和哺乳動(dòng)物生物系統(tǒng)發(fā)育的差距,兩者的親緣關(guān)系較疏遠(yuǎn),哺乳動(dòng)物的蛋白質(zhì)抗原在禽體內(nèi)更易產(chǎn)生特異性較高的抗體,所以 IgY 的生化特性優(yōu)于哺乳動(dòng)物抗體。當(dāng) IgY 與相應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物時(shí),不能夠激活哺乳動(dòng)物的補(bǔ)體系統(tǒng),不與哺乳動(dòng)物細(xì)胞的 Fc 受體、人抗鼠抗體、葡萄球菌蛋白A(SPA)和葡萄球菌蛋白 G(SPG)結(jié)合,也不能與哺乳動(dòng)物的類風(fēng)濕因子(RF)發(fā)生反應(yīng)。因此,使用 IgY 可以避免由于補(bǔ)體系統(tǒng)激活所導(dǎo)致的假陰性結(jié)果的產(chǎn)生以及抗原抗體復(fù)合物激活 Fc 受體所引起的蛋白表面發(fā)生的改變,進(jìn)而對(duì)試驗(yàn)結(jié)果造成的干擾的發(fā)生。
卵黃抗體制備簡單且來源廣泛。雞受到抗原刺激后 7~10d,蛋黃中就有相應(yīng)的抗體產(chǎn)生,約 20d 能達(dá)到高峰,當(dāng)再次受抗原刺激后,又可產(chǎn)生一個(gè)新的高峰。經(jīng)實(shí)驗(yàn)表明,可持續(xù)獲得高特異性的 IgY 長達(dá) 28 周,且每毫升蛋黃液中含有 8~20mg 的抗體。此產(chǎn)量比從哺乳動(dòng)物體內(nèi)獲得抗血清抗體的產(chǎn)量高很多。此外,動(dòng)物的采血不僅對(duì)動(dòng)物本身產(chǎn)生極大的應(yīng)激,而且費(fèi)時(shí)、費(fèi)工,不易于規(guī)?;a(chǎn),故卵黃抗體的制備為規(guī)?;a(chǎn)提供廣闊的前景。
