顧江萍 上海交通大學(xué)
在小腸上皮細(xì)胞、腸內(nèi)容物或糞便中檢測豬傳染性腸胃炎病毒（TGEV）是獸醫(yī)診斷仔豬該病的簡單和最常用的方法。免疫組化法包括免疫熒光法(IF)和免疫過氧化物酶技術(shù)，其中免疫組化法較為常用。若IF或免疫過氧化物酶試驗(yàn)呈陽性，并伴有腹瀉癥狀，則幾乎肯定為TGEV。國外有學(xué)者在小腸上皮細(xì)胞中檢測TGEV抗原。采集病死豬小腸，或者在腹瀉早期將豬捕殺，取空腸和回腸粘膜涂片或?qū)⒖漳c和回腸制備冷凍切片，進(jìn)行直接或間接免疫熒光檢測的方法己經(jīng)建立，并得到廣泛應(yīng)用。但該方法必須在死后或撲殺后才能進(jìn)行。有學(xué)者建立了通過采取豬只的扁桃體組織，制成冷凍切片，進(jìn)行熒光檢測的活體診斷方法，己被廣泛用于疫病普查和口岸檢疫。另外，應(yīng)用抗TGEVN蛋白的單克隆抗體免疫過氧化物酶技術(shù)檢測小腸組織中病原的方法己建立，且TGEV的單克隆抗體已被用IF或免疫過氧化物酶試驗(yàn)中。用上述兩種試驗(yàn)方法在呼吸道組織和鼻腔上皮細(xì)胞中均檢測出TGEV。用抗TGEV單克隆或多克隆抗體雙層夾心酶聯(lián)免疫吸附法（ELISA）已被廣泛應(yīng)用于檢測在細(xì)胞培養(yǎng)、糞便和腸內(nèi)容物中的TGEV，是一種快速且適用于從活豬中取得大量樣品的診斷方法。
用電鏡檢測TGEV也是常用的診斷方法之一。通過電鏡負(fù)染色法證明，在感染豬腸內(nèi)容物和糞便中有TGEV。發(fā)病期間病毒存在于病豬的許多器官中，試驗(yàn)證實(shí)除脾臟外，其他器官均可檢測到病毒,但是以空腸、十二指腸和腸系膜淋巴結(jié)中含毒量最高。通過電鏡觀察，病毒多分布在胞漿的空泡里和微絨毛間隙。在微絨毛間的病毒往往呈串球狀排列。研究證明，免疫電鏡(IEM)比常規(guī)EM技術(shù)更好，前者對檢測臨床樣品或細(xì)胞培養(yǎng)物中的TGEV更敏感，并可提供病毒血清學(xué)鑒定。此外，用IEM更易區(qū)分TGEV和常見的膜類碎片，而且同時(shí)可檢測其它腸道病毒的存在。
