顧江萍 上海交通大學(xué)
畜牧獸醫(yī)研究了解到3種非結(jié)構(gòu)蛋白分別由ORF1、ORF3及ORF7編碼。過去對TGEV的非結(jié)構(gòu)蛋白的了解比較少，直到確定ORF1編碼病毒的聚合酶后才對其非結(jié)構(gòu)蛋白有所認(rèn)識。ORF1a編碼產(chǎn)物中有2個類木瓜蛋白酶區(qū)，1個類3C蛋白酶區(qū)和1個類生長因子和受體區(qū)。在類3C蛋白酶區(qū)兩側(cè)各有1個明顯的疏水區(qū)。ORF1b編碼產(chǎn)物中有金屬離子結(jié)合區(qū)和解旋酶區(qū)。在伯爾尼(Berne)病毒、動脈炎病毒及TGEV、鼠肝炎病毒(MHV)、雞傳染性支氣管炎病毒(IBV)、人冠狀病毒(HCV229E)中，聚合酶區(qū)、金屬離子結(jié)合區(qū)、解旋酶區(qū)及ORF多肽的羧基端都具有明顯的保守性。
HegyiA等研究發(fā)現(xiàn)在ORF1產(chǎn)物中存在有14個類3C蛋白酶切位點，它們集中于ORFla多肽(7個)和ORFlb多肽(5個)的羧基端?；?位于S和sM蛋白基因之間，有ORF3a和ORF3b兩個閱讀框。Wood等研究發(fā)現(xiàn)ORF3a在TGEV的某些小蝕斑(SP)變異株和豬呼吸道冠狀病毒(PRCV)中缺失，研究表明ORF3a不是病毒復(fù)制所必需的，但這種缺失可能影響病毒毒力和組織嗜性，并且由mRNA3翻譯的多肽可能參與了病毒吸附細(xì)胞的過程。ORF3b是分子量為27.7KD的非結(jié)構(gòu)蛋白。目前雖然己經(jīng)從體外翻譯mRNA3得到ORF3b編碼的多肽，但是在感染細(xì)胞中還未成功的檢測到mRNA3的轉(zhuǎn)譯產(chǎn)物。在TGEV感染的細(xì)胞中檢測到了ORF7編碼的分子量為14KD的HP蛋白，該蛋白在感染中最終定位于細(xì)胞核，其進入細(xì)胞核的作用可能是TGEV克服宿主抵抗，而不是在細(xì)胞培養(yǎng)中病毒復(fù)制及其子代病毒所必需的。
OrtegoJ.等通過反向遺傳技術(shù)構(gòu)建缺失ORF7的重組傳染性胃腸炎病毒(rTGEV-△7)cDNA，將其轉(zhuǎn)染細(xì)胞后，發(fā)現(xiàn)重組病毒在細(xì)胞培養(yǎng)物上的繁殖效率與野生型病毒毒株相同，而且也很穩(wěn)定，但將rTGEV-△7接種于仔豬后，病毒在腸道和肺中的復(fù)制能力明顯減少，致病性也降低，這說明ORF7是病毒繁殖的非必需基因，同時該基因可能影響病毒的致病性。
