（本文根據(jù)“第八屆勃林格國際奶牛健康論壇暨中國奶牛場乳房炎防控8點計劃”專家講課內(nèi)容整理）
    乳房炎致病菌話題可能很有爭議，很多一線技術(shù)人員和獸醫(yī)覺得乳房炎致病菌真那么重要嗎？需要花費很大精力和財力在牧場搭建實驗室、送檢，做病原菌檢測、學習不同病原的解讀嗎？答案是它確實很重要，而且需要我們?nèi)ブ匾暋?br>
    乳房炎是一種細菌性疾病

    從定義上看，奶牛乳房炎是一種主要由病原菌感染引發(fā)的乳腺組織內(nèi)的炎癥反應(yīng)。一些文獻研究顯示導致乳房炎的病原菌大約有一多百種，常見的二十多種。乳房炎看似是很簡單的一種疾病，但由于所涉及的病原菌非常復雜。所以，它又是一種非常復雜的疾病。
    上圖是勃林格收集的2021年1-6月份乳房炎病原診斷數(shù)據(jù)，可以看到導致臨床乳房炎的病原菌種類非常多，圖中列出的就有十幾種，其他病原是指其它不常見但是也能在臨床乳房炎奶樣中分離出來的一些病原菌。該數(shù)據(jù)來自國內(nèi)77個牧場的1034份臨床乳房炎奶樣，共分離出1237株病原，占比較高的診斷結(jié)果包括有凝固酶陰性葡萄球菌、大腸桿菌、克雷伯氏菌和無生長，無生長是采集有臨床癥狀牛的奶樣送檢到實驗室沒有培養(yǎng)出任何細菌，這樣的病牛是否還需要使用抗生素進行治療？這是需要大家思考的。支原體為單獨檢測項目，來自61個牧場的895份樣品專門篩查支原體，其中只有77份樣品檢出陽性，占比8.6%。
    如果把乳房炎致病菌按照生化特點區(qū)分，可以大致分為革蘭氏陽性菌、革蘭氏陰性菌以及其他病原菌，比如金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌、凝固酶陽性葡萄球菌，這些都屬于革蘭氏陽性菌，而大腸桿菌、克雷伯氏菌屬于革蘭氏陰性菌。革蘭氏陽性、陰性區(qū)分主要基于革蘭氏染色決定。而支原體沒有細胞壁，所以它既不屬于陽性也不屬于陰性。酵母菌是真菌類，不屬于常規(guī)的細菌；原壁菌屬于藻類，也不屬于正常的革蘭氏陽性菌和陰性菌。

    圖中標紅的是目前大家普遍認同的三種傳染性致病菌，即金黃色葡萄球菌、無乳鏈球菌以及支原體，除了這三種致病菌，其它乳房炎致病菌目前都歸類為環(huán)境性致病菌。

    為什么要了解乳房炎致病菌？

    乳房炎常見致病菌有20多種，只有真正了解常見病原菌的臨床特點、傳播模式，才能更精準地制定防控和治療方案。由于不同病原菌感染位置不同，感染途徑有所差別，導致的臨床癥狀也會存在差異。所以，我們基于病原菌所設(shè)定的防治方案肯定要有所區(qū)別。同時，不同的病原菌對牧場的經(jīng)濟效益影響也有差異。
    上圖“+”、“++”、“+++”代表細菌在此位點存在的傾向等級。如果在某個位點是+++，證明感染之后主要存在于這個位點。比如金黃色葡萄球菌感染乳腺之后主要存在于上皮細胞。所以，它的感染位點比較深，臨床上也表現(xiàn)為治療難度大。如果沒有達到真正的細菌學治愈率，金葡菌感染的病例會不斷地復發(fā)。無乳鏈球菌、停乳鏈球菌等環(huán)境性鏈球菌主要存在的位點是乳池、乳導管和腺泡。而大腸桿菌、克雷伯氏菌等革蘭氏陰性菌由于有內(nèi)毒素的影響，比較容易進入血液，所以臨床上一些重度急性乳房炎大多數(shù)都是由革蘭氏陰性菌導致的。凝固酶陰性菌、鏈球菌所導致的臨床癥狀相對比較溫和，但大腸桿菌、克雷伯氏菌感染過程中會釋放內(nèi)毒素，刺激機體產(chǎn)生嚴重的全身性炎癥反應(yīng)，易導致菌血癥。所以，不同的病原菌在乳腺內(nèi)感染的位置存在差別。

    感染途徑不同

    雖然所有乳房炎都是病原菌通過乳頭孔進入乳腺內(nèi)造成感染的過程，但是環(huán)境性病原菌和傳染性病原菌的傳播方式有本質(zhì)區(qū)別。環(huán)境性病原菌分布的范圍非常廣，會寄生在牛生活的所有場所。傳染性病原菌比如金葡菌、無乳鏈球菌、支原體主要存在于被感染牛的乳腺和乳汁里，它們喜歡寄生的位置在牛身上。所以，如果對臥床墊料或者過道采樣送檢做病原檢測，金葡菌、無乳鏈球菌、支原體的檢出概率非常低。

    環(huán)境性乳房炎主要是奶牛與環(huán)境中的病原接觸造成感染。比如奶牛乳頭孔張開了，擠奶之后沒有給它足夠時間閉合，這時如果在環(huán)境中接觸到了感染源，它就會通過開放的乳頭孔進入到乳腺內(nèi)造成感染。傳染性病原菌會造成牛與牛之間的傳播，主要傳播途徑是通過擠奶傳播，因為傳染性病原菌喜歡生存的場所是奶牛乳腺和乳汁里，而擠奶是釋放乳汁的過程。所以，如果病原污染了擠奶設(shè)備，下一頭健康奶牛再使用擠奶設(shè)備進行擠奶時就有很大被感染的風險。

    上圖是2013年美國著名乳房炎專家Pamela進行的一項研究，他收集了5個牧場622例臨床乳房炎病例進行病原檢測，也做了臨床癥狀的評分。綠色柱代表輕度1級乳房炎，黃色柱代表中度2級乳房炎，紅色柱代表3級重度乳房炎。哪幾種病原菌導致的2、3級乳房炎比例相對比較高？答案是大腸桿菌、克雷伯氏菌、腸桿菌屬，這三種病原菌都屬于革蘭氏陰性桿菌。為什么革蘭氏陰性桿菌所導致的臨床癥狀更嚴重呢？因為革蘭氏陰性菌產(chǎn)生的內(nèi)毒素會刺激機體產(chǎn)生更嚴重的炎癥反應(yīng)。所以，針對革蘭氏陰性菌感染病例治療上一定要重視抗炎。國外有相關(guān)疫苗可減輕臨床癥狀，國內(nèi)現(xiàn)在還沒有，唯一的替代方式就是使用抗炎類藥物緩解它所產(chǎn)生的嚴重的炎癥反應(yīng)。
    臨床性乳房炎臨床癥狀有差別，隱性乳房炎也有陽性和陰性菌的差異。上圖是來自威斯康辛大學的一項研究，收集了所有的隱性慢性感染高體牛奶樣進行了病原檢測分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)革蘭氏陽性菌占比62%，革蘭氏陰性菌僅占5%。所以，革蘭氏陽性菌更容易導致隱性的慢性感染。如果牧場有大罐奶體細胞數(shù)較高的問題，你面臨的最主要敵人是隱性感染牛。如果牧場設(shè)定有非常明確的臨床乳房炎揭發(fā)SOP，臨床乳房炎奶不會進入大罐，而肉眼看不到任何臨床癥狀的隱性感染牛貢獻的體細胞數(shù)占據(jù)主導，隱性感染牛對應(yīng)的主要是革蘭氏陽性菌。所以，如果大罐奶體細胞數(shù)高，絕對不是大腸桿菌或者克雷伯氏菌導致的，而是凝固酶陰性葡萄球菌、金黃色葡萄球菌以及鏈球菌，這類病原菌才是你真正要面對的敵人。

    不同致病菌防治方案不同

    由于不同的病原菌有不同的臨床特點。所以，針對不同病原菌所采取的防治方案也存在不同。革蘭氏陽性菌的特點是更容易導致輕度臨床乳房炎和隱性、慢性感染。為什么導致慢性感染？因為我們只能通過個體牛體細胞數(shù)變化來揭發(fā)這類病例，一旦沒有及時揭發(fā)，就會形成慢性的長期感染。國內(nèi)外試驗數(shù)據(jù)顯示，革蘭氏陽性菌抗生素治愈率較高，除了慢性金黃色葡萄球菌感染，它是一種很難處理的病原菌，臨床治療效果確實不佳。另外，乳房鏈球菌的高發(fā)階段在干奶期。所以，如果你的牧場環(huán)境性鏈球菌檢出率比較高，可能需要排查干奶期的乳房炎防控措施是否有效。

    革蘭氏陰性菌更容易導致臨床性乳房炎，癥狀的嚴重程度取決于內(nèi)毒素的釋放情況。另外，不同的革蘭氏陰性菌抗生素治療治愈率有明顯差異。比如大腸桿菌使用抗生素治療可能有明顯改善，但克雷伯氏菌治愈率比較低，尤其細菌學治愈率相對較低。由于革蘭氏陰性菌釋放內(nèi)毒素會導致更嚴重的炎癥反應(yīng)。所以，在治療層面上要重視炎癥的控制。如果牧場革蘭氏陰性菌發(fā)病率高，防控重點主要在臥床糞污管理、擠奶前藥浴、前擦拭，因為在臥床和糞便中存在的病原菌量非常大。

    如果從傳染性致病菌和環(huán)境性致病菌層面分析，傳染性致病菌會造成牛與牛之間的傳播，針對這種病原菌一定要及時揭發(fā)、隔離，然后做出明確的淘汰決策。另外，傳染性病原菌主要通過擠奶過程傳播，需要加強奶廳管理。此外，一定要重視牧場的生物安全?？傮w來講，三種傳染性致病菌治療希望比較大的是無乳鏈球菌。如果牧場揭發(fā)到無乳鏈球菌病例一定要及時使用抗生素進行治療，臨床數(shù)據(jù)顯示它的治愈率相對非常高。目前市面上沒有一款針對支原體有治療效果的抗生素。所以，很多牧場對于支原體都是零容忍管理措施。針對金葡菌的治療，可以結(jié)合個體牛信息，如果它的胎次相對較低，體細胞數(shù)也不高，揭發(fā)時間點處在泌乳期，可以先嘗試用泌乳期抗生素進行治療。如果泌乳期抗生素治療失敗了，還可以使用干奶藥在干奶期再嘗試治療一次。如果還是不行，可能需要考慮將牛淘汰。如果持續(xù)把它留群，又不做隔離措施，肯定會增加其它健康牛群患乳房炎的風險。

    環(huán)境性致病菌在牛與牛之間不傳播，主要是乳區(qū)接觸到環(huán)境中的感染源造成的一種感染。所以，感染發(fā)生在擠奶時或擠奶間隔。環(huán)境性病原菌種類很多，不同的病原有不同的特點，因此不同病原從防控方向上會有所差別。舉例來說，如果牧場檢出牛棒狀桿菌比較多，證明藥浴操作可能不到位或者選擇的藥浴產(chǎn)品有問題，因為牛棒狀桿菌是所有乳房炎致病菌種最容易被藥浴液殺死的。所以，牛棒狀桿菌檢出率比較高就排查藥浴操作。如果牧場揭發(fā)到綠膿桿菌（銅綠假單胞菌）比較多，那就去排查水源，飼喂牛的水以及沖刷奶廳地板的水都要排查，因為綠膿桿菌比較喜歡在水源繁殖。乳房鏈球菌高發(fā)感染階段在干奶期。所以，如果牧場檢出乳房鏈球菌比較多，主要看干奶期的防控。大腸桿菌與有機墊料、糞便的清理、前藥浴或者前擦拭操作的相關(guān)性更高一些。

    傳染性致病菌的防控重點是找出這些感染牛，切斷感染源。所以，傳染性病原菌防控要點是通過科學方式準確、及時地揭發(fā)出陽性感染牛。而環(huán)境性致病菌防控關(guān)鍵在于找出感染源，你需要分析牧場整體臨床乳房炎累計的數(shù)據(jù)，評估主勢菌所在場所并加強管理。

    不同致病菌對牧場經(jīng)濟效益影響不同

    如果把一例乳房炎所造成的經(jīng)濟損失按照病原菌進行區(qū)分，革蘭氏陽性菌感染導致的損失大概是133.73美元。但革蘭氏陰性菌感染造成的經(jīng)濟損失是211美元，明顯高于革蘭氏陽性菌。如果是其他病原菌導致的感染，造成的經(jīng)濟損失是95美元。
    上圖比較了大腸桿菌和克雷伯氏菌感染的牛對奶產(chǎn)量的影響，藍色是大腸桿菌的泌乳曲線，紅色是克雷伯氏菌的泌乳曲線，可以看到克雷伯氏菌對奶產(chǎn)量的影響最嚴重。
    另外，上圖是不同的革蘭氏陽性菌對于體細胞的影響，包括金葡菌、無乳鏈球菌、凝固酶性葡萄球菌和棒狀桿菌?？傮w來講，無乳鏈球菌對于牧場的體細胞影響最嚴重。所以，無乳鏈球菌爆發(fā)的牧場會表現(xiàn)非常明顯的大罐奶體細胞數(shù)升高的問題。
    另外，不同病原菌所導致的淘汰風險也有差異，如果某一種病原菌更容易導致三級重度乳房炎，淘汰的風險肯定會更高。所以，革蘭氏陰性菌導致的淘汰風險比革蘭氏陽性菌更高一些。

    如何有效利用乳房炎病原診斷數(shù)據(jù)？
    
    基于不同病原有不同的特點，如果想要優(yōu)化管理措施，真正科學地做到節(jié)本增效，一定要利用好病原診斷的數(shù)據(jù)做到精準防治。另外，可以通過病原診斷體系建立一個預(yù)警系統(tǒng)，預(yù)警系統(tǒng)不僅能幫助牧場揭發(fā)傳染性致病菌，還能監(jiān)控牧場有沒有新病原的流行。同時，細菌會隨著氣候環(huán)境、管理措施的變化而變化，一旦出現(xiàn)了某一種特殊病原菌高發(fā)的情況，需要引起重視并且及時采取措施。此外，病原診斷結(jié)果可以幫助優(yōu)化牧場的淘汰決策。最后，如果能夠用好病原診斷數(shù)據(jù)，再結(jié)合牧場管理方案，這樣會使防控措施和治療方案更精準，抗生素的用量減少，成本降低，而且牛奶質(zhì)量也提高了，因為沒有了抗生素殘留的風險，體細胞數(shù)也控制在理想的范圍內(nèi)。

    利用乳房炎病原診斷數(shù)據(jù)主要從四個方面：一是監(jiān)控病原的流行狀況，積累臨床乳房炎病例數(shù)據(jù)，幫助牧場建立乳房炎病原菌數(shù)據(jù)庫，及時揭發(fā)傳染性病原的感染牛，清晰了解牧場乳房炎主要是由哪種病原菌導致的。新的病原也可以做到實時監(jiān)控。二是優(yōu)化治療方案，基于對不同病原的清楚了解，針對某種病原的治愈預(yù)期會有判斷。還有無生長病例要不要使用抗生素？知道革蘭氏陽性菌和陰性菌的區(qū)別，能夠幫助牧場明確治療的側(cè)重點，比如陰性菌要更重視抗炎。三是利用病原診斷數(shù)據(jù)優(yōu)化防控方案。最后是明確淘汰的決策。

    總之，如果你希望能夠更科學地管理牧場乳房炎問題，一定要引入因菌防治的理念，因菌防治就是因菌治療+因菌防控。

    因菌防治如何落地實施？

    了解病原菌對于乳房炎的管理確實有用，但因菌防治的方案如何在牧場落地實施？方案的實施需要依賴獸醫(yī)部門和品控部門的密切配合。獸醫(yī)負責兩個層面的工作，一是嚴格執(zhí)行無菌采樣流程、對樣品進行登記并及時送檢實驗室。二是解讀檢測結(jié)果，優(yōu)化治療和防控方案。品控人員需要記錄樣品信息、對樣品進行合理保存和處理、執(zhí)行準確的鑒定流程并及時上傳檢測結(jié)果。

    另外，不同樣品作用不同，采樣時需要區(qū)分個體牛奶樣、多頭牛的混合樣以及大罐奶樣。個體牛的乳區(qū)樣品主要用于日常乳房炎流行趨勢的監(jiān)控。大罐奶奶樣主要用于監(jiān)測傳染性致病菌，而不需要了解大罐奶里所有病原類型。多頭牛和個體牛的混合樣一般用于篩查某一種特殊傳染性病原菌，為了節(jié)省檢測的成本，可以使用多頭?；旌蠘舆M行初期篩查，然后再具體到個體牛的樣品。

    搭建乳房炎病原診斷檢測系統(tǒng)

    實驗室出具檢測報告需要搭建診斷檢測系統(tǒng)。目前乳房炎可選擇的診斷體系有很多，比如傳統(tǒng)生化實驗、便攜式快捷培養(yǎng)基、PCR檢測體系。不同牧場由于檢測目的、硬件設(shè)施，包括人員配備或者預(yù)算都會有差別，大家會選擇不同的診斷體系。但是，無論選擇哪一種診斷體系，都必須要清晰地了解它的優(yōu)缺點。

    傳統(tǒng)的生化培養(yǎng)缺點是流程比較復雜，需要配備固定的人員，優(yōu)點是成本比較低，檢出病原菌的種類非常多?？旖菖囵B(yǎng)基優(yōu)點是對人員、牧場實驗室環(huán)境沒有太多限制，缺點是成本比較高，而且可檢出的病原類型較少。所以，牧場需要評估你選擇的這款培養(yǎng)基能否滿足你的目的和需求。PCR診斷體系缺點是對樣品質(zhì)量要求高，對于人員操作的水平要求也很高，而且非常容易出現(xiàn)假陽性結(jié)果，它的優(yōu)點是出結(jié)果非?？欤珳识群芨?。所以，如果想要篩查大罐奶或者混合奶樣里的傳染性致病菌，PCR確實是非常不錯的選擇。

    如果牧場沒有條件搭建實驗室診斷體系，可以就近選擇離牧場比較近的高校實驗室或者專業(yè)實驗室進行合作。如果你希望在牧場搭建一套診斷體系，勃林格也有專門的人員提供相應(yīng)的培訓服務(wù)。

    結(jié)合病原診斷結(jié)果進行數(shù)據(jù)分析

    首先，要想分析病原診斷數(shù)據(jù)，必須得了解不同致病菌的臨床特點。其次，定期對病原診斷數(shù)據(jù)進行整理，只有累計的數(shù)據(jù)才能看到趨勢的變化，間斷的、零散的數(shù)據(jù)是沒有任何趨勢可言的。第三，乳房炎致病菌數(shù)據(jù)絕對不能單獨分析，一定要結(jié)合其他發(fā)病信息如發(fā)病率、復發(fā)率、發(fā)病階段、嚴重程度、平均治療天數(shù)等進行綜合分析，包括分析主要流行病原類型、高發(fā)階段，這樣才能有整體的宏觀思路。另外，病原診斷的結(jié)果可以幫助評估當前治療方案的治療效果以及評估當前防控措施的有效性。

    總結(jié)

    乳房炎是一種非常復雜的細菌性疾病，涉及細菌種類繁多。如果想要科學管理乳房炎，科學使用抗生素，需要了解各個牧場病原的流行狀況。

    一菌一世界，不同的乳房炎致病菌有不同的臨床感染特點，主要表現(xiàn)在感染位置不同、感染途徑不同、臨床癥狀不同、對牧場經(jīng)濟效益影響不同，防治方案不同。

    我們一定要利用好病原診斷的數(shù)據(jù)，真正優(yōu)化乳房炎綜合防治方案。因菌防治的落地實施就是每個獸醫(yī)、品控實驗室的配合、體系的搭建、病原診斷數(shù)據(jù)的解讀和分析，這些完整地閉合成一個相對成套的因菌防治的理念。